冯忠 实战经验丨竞争性ELISA:受体蛋白包被浓度及配体蛋白-Tag饱和浓度的确定 ELISA试剂盒是目前免疫检测的常见技术,常用于抗原的定量测定、抗体的效价检测、疫苗的滴度检测、血药浓度测定等领域。ELISA方法是免疫学研究中的一项重要技术,一天内可检测几百甚至上千份样品,具有快速高效的特征,因此不仅用于临床样品的检测,还适用于血清流行病学检测。ELISA试剂盒使用方便,快速且稳定,在生物医药各领域广泛应用,如检测体液中的循环抗原,可用于疾病早期诊断和预防。 本期内容由 中国药... 实验指南及答疑 2023-12-25
程浩 ELISA实验前,你需要了解的细胞培养&样本收集处理 细胞培养 Cell Culture 细胞培养是指细胞在体外的培养技术,即在无菌条件下,从机体中取出组织或细胞,模拟机体内正常生理状态下的基本生存条件,让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。通过细胞培养,我们可以获得大量性状相同的细胞,以便研究细胞的形态结构、化学组成、功能及机制。在生物实验中,细胞培养周期往往比哺乳动物短,因此,细胞培养是一种更为便捷的体外验证方法。 本文带大家了解一下 哺乳动... 实验指南及答疑 2023-02-08
程浩 ELISA试剂盒性能解读 Elabscience ® 每个ELISA试剂盒内,均附有一份质检报告和说明书,里面包含各种各样的性能参数,它们都有什么意义呢? 01 质检报告 ELISA试剂盒内的质检报告单,表明该试剂盒在出厂前满足 外观完整、组分齐全、无变质 等标准规定,且符合 标曲线性良好(R 2 ≥0.99)、批内差小(<10%) 等性能要求,保证各位实验er收到的试剂盒符合标准。老师再也不用担心我收到假冒伪劣试剂盒啦!... 实验指南及答疑 2023-02-03
程浩 血清or血浆?ELISA指标检测样本如何选 做ELISA实验时, 检测的指标是用血清样本好还是用血浆样本? 先给出结论,我们在判定指标检测时: 凝血功能类指标的检测 最好选择 血浆 , 免疫类指标的检测 最好选择 血清 。对于其他类型指标,包括细胞因子的变化等,通常情况下血清或血浆都可以选择。 血清与血浆的区别 ◇ 血清中无纤维蛋白原和某些凝血因子; ◇ 血清中无参与凝血的血浆蛋白; ◇ 血浆中无一些凝血过程中血小板释放的物质。 Tips:... 实验指南及答疑 2022-11-25
程浩 ELISA标曲异常的原因及对策(下) 前段时间,我们发布了文章 ELISA标曲异常的原因及对策(上) (点击查看),今天继续跟大家分享在实验过程中遇到的 ELISA标曲异常的相关案例,并详细解释其原因和对策,助力大家顺利开展实验。 例5:显色正常,OD无法读值 标准品浓度 (pg/mL) OD 1000 2.579 2.397 500 1.835 1.786 250 1.161 1.244 125 0.657 0.704 62.5 0... 实验指南及答疑 2022-11-09
程浩 ELISA标曲异常的原因及对策(上) ELISA实验中,标曲不仅能够帮助我们计算出样本浓度,还是指示实验人员操作手法是否规范的重要标志。 问: 如何判断我绘制的标准曲线是否有效呢? 答: 在显色阶段,控制标准品 前4孔有 明显的蓝色梯度 ,以及标准品 最大OD值≥1.2 ,标准曲线的线性回归相关系数 R 2 ≥0.99 ,即可作为有效标曲。 但是,在ELISA实验过程中,往往有 标曲异常 的情况出现,下面将介绍几种 特殊情况 ,并将其... 实验指南及答疑 2022-10-26
程浩 ELISA不同色彩背后,藏着哪些特殊秘密? ELISA又称酶联免疫吸附测定,自1971年问世至今,已成为 定量检测体液中各种靶标蛋白含量的常用方法。 ELISA呈色反应可进行定性或定量分析,利用HRP酶催化TMB,反应产生蓝色亚胺溶液,加入终止液后,使蓝色阳离子转变为黄色的联苯醌。 图:辣根过氧化物酶催化氧化3,3',5,5' -四甲基联苯胺 [1] 除了常见的蓝色和黄色,ELISA实验过程中,也会出现一些不同寻常的多样色彩。每种颜色背后,... 实验指南及答疑 2022-10-11
程浩 检测实验样本中的靶蛋白,ELISA、WB、IHC应该选哪个? 酶联免疫吸附测定(ELISA)、蛋白免疫印迹(WB)、免疫组化(IHC) , 是免疫学三大常用工具,应用于 目的蛋白的定量、定性和定位分析。 这三种免疫学检测手段,都是基于抗原与抗体特异性结合的原理,其差异性在于: ◆ ELISA 更适合定量检测胞外的分泌性蛋白 ◆ WB 多用于胞膜、胞浆或胞核蛋白的半定量检测 ◆ IHC 主要用于胞蛋白的定位 在实验技术方面,Elabscience ® 已有13... 实验指南及答疑 2022-09-26
程浩 ELISA实验FAQs 之试剂盒、样本、数据处理 本文主要介绍ELISA试剂盒、实验样本、ELISA数据处理相关问题,帮助大家更好地开展实验 试剂盒 Q1:科研试剂盒与临床试剂盒的区别 ? A1: 临床试剂是经过权威机构认可的,如FDA、CFDA等;而科研试剂一般是厂家自主研制,不需要通过权威机构验证。 经营临床诊断类产品的机构需要取得《医疗器械经营企业许可证》;经营科研试剂的机构不需要此证件。 临床试剂盒一般仅用于检测人血清/血浆等较为单一的分... 实验指南及答疑 2022-09-16
程浩 7个小妙招,教你如何选ELISA试剂盒 市面上的ELISA试剂盒五花八门,质量良莠不齐。 如何浪里淘金,选择既符合科研需求,又品质上乘的ELISA试剂盒呢? Elabscience教你七招,快速搞定ELISA试剂盒的选择! 01 查找待测样本的蛋白浓度 通过检索SCI文献、Genecards、Mayocliniclabs等,获得目标蛋白的表达部位及表达浓度参考值, 比较ELISA试剂盒中给出的样本测值与参考值是否一致。 02 明确试剂盒... 实验指南及答疑 2022-09-15
程浩 ELISA实验FAQs之实验结果OD值偏高 在往期文章中《 ELISA实验FAQs之实验结果OD值偏低 》,已经帮大家汇总了ELISA实验结果OD值偏低的问题分析和解决方案,相信大家一定收获满满。 除了上述问题,大家对ELISA实验结果OD值偏高的问题是否存在困惑呢?不要慌!咱们这就将 ELISA实验结果OD值偏高 的原因和对策一一道来,助力大家顺利完成实验数据分析。 整体OD值偏高 可能原因 相应对策 a. 试剂盒组分被污染 使用新的试剂... 实验指南及答疑 2022-09-15
程浩 ELISA实验FAQs之实验结果OD值偏低 ELISA是一个非常严谨、极其考验操作者技巧和经验的实验,检测结果数值低、标准曲线梯度差、背景值高、变异系数大等诸多问题也是兵家常事。 本文将常见的 ELISA实验结果OD值偏低 的原因及对策进行了汇总,具体如下! 整体OD值偏低或无信号 可能原因 相应对策 ● 试剂盒组分失活 使用新的试剂盒,按照说明书要求保存试剂盒 ● 试剂盒组分未平衡 试剂盒每个组分都需要平衡至室温后进行实验 ● 试剂混用或... 实验指南及答疑 2022-09-09