做ELISA实验时,检测的指标是用血清样本好还是用血浆样本?先给出结论,我们在判定指标检测时:凝血功能类指标的检测最好选择血浆,免疫类指标的检测最好选择血清。对于其他类型指标,包括细胞因子的变化等,通常情况下血清或血浆都可以选择。
血清与血浆的区别
◇ 血清中无纤维蛋白原和某些凝血因子;
◇ 血清中无参与凝血的血浆蛋白;
◇ 血浆中无一些凝血过程中血小板释放的物质。
Tips:血浆可以通过去除纤维蛋白原等凝血因子形成血清。
◆ 血清多用于血液生化、免疫等方面的检测;
◆ 血浆多用于凝血等方面的检测;
◆ 全血则多用于血细胞、血常规、血沉等方面的检测。
血清及血清的主要成分
血清:是指血液凝固后,血浆成分中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体,它是不含血细胞(包括血小板)等成分的血液液体部分。
血清的主要成分 |
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血清蛋白 |
总蛋白、白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白等 |
糖类 |
葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖 |
脂质 |
总胆固醇、三甘油脂、β-脂蛋白、HDL胆固醇 |
血清酵素 |
GOT、GPT、γ-GTP、LDH(乳酸脱水酵素)、淀粉酶、碱性碳酸酶、酸性碳酸酶、胆素脂酶、醛缩酶 |
激素 |
促甲状腺激素、甲状腺激素 |
色素 |
胆红素、吲哚青绿(ICG)、磺溴酞钠(BSP) |
有机盐 |
肌氨酸酐、尿素氮、尿酸、肌氨酸酐·净化值 |
电解质 |
钠(Na)、钾(K)、钙(Ca)、氯(Cl) |
血浆与血浆的主要成分
血浆:血液的重要组成部分,是全血经抗凝处理后,通过离心分离出全部血细胞(包括血小板),所获得的呈淡黄色透明液体的部分。血浆中含有纤维蛋白原(纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用)和凝血因子。
血浆的主要成分 |
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血浆蛋白 |
可分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原等 |
非蛋白氮 |
尿素、尿酸、肌酐、氨基酸、多肽、氨和胆红素等 |
无机盐 |
血浆中的无机物,绝大部分以离子状态存在。如:Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、HCO3-、HPO42-、SO42-等 |
在药代研究中二者各有优缺点:
① 血浆中含有抗凝物质(EDTA或肝素),可能干扰化合物的结合或检测,血清则无;
② 血浆制备快速,直接低温离心后即可分离,血清制备则耗时较长。这一点对药代试验影响较大,因给药后4小时内一般取血点较为密集;
③ 血清的凝血过程可能会与药物产生吸附作用,从而减少血清的含量,造成实验中的误差。
血清、血浆的制备方法
# 血清样本的制备 #
① 使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液样本,将试管或离心管在室温下放置1小时或2-8℃过夜,分离出血清;
② 2-8℃条件下,以1000×g离心20分钟,小心收集上层血清。
# 血浆样本的制备 #
① 使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本,采集后30分钟内,2-8℃条件下,以1000×g离心15分钟,小心收集上层血浆;
② 常见的抗凝剂包括:EDTA钠盐,肝素钠,枸橼酸钠等。ELISA实验中,通常推荐EDTA盐(EDTA-Na2或EDTA-K2)作为抗凝剂。
以上是关于ELISA指标检测是用血清样本还是血浆样本的实验干货。更多实验相关问题,请咨询网页右侧在线客服~