程浩 Treg细胞简介及指标选择 Th1/Th2/Th17和Treg细胞是流式实验中常见的T细胞检测对象,往期的 流式课堂 给大家介绍了 Th1/Th2/Th17细胞简介及指标选择 ,今天给大家简要介绍 Treg细胞 ,并讲解其检测指标及实例分析。 01 什么是Treg细胞? Treg(调节性T细胞,Regulatory T cells)是免疫系统的重要调节细胞,对维持自身耐受性和免疫细胞稳态至关重要,它 由胸腺产生后输出至外周 ... 流式课堂 2023-08-29
程浩 Th1/Th2/Th17细胞简介及指标选择 Th1/Th2/Th17和Treg细胞是流式实验中常见的T细胞检测对象,今天来给大家做一个Th1/Th2/Th17细胞的简要介绍,并讲解其检测指标及实例分析。 图1.Th细胞分类示意图 (图片来源于《医学免疫学》) Th细胞,又称辅助性T细胞(helper T cell),主要通过不同亚群及相互作用,来活化巨噬细胞和其他免疫细胞以吞噬和清除抗原。Th细胞可以分泌多种细胞因子,参与人体内的各种免疫反... 流式课堂 2023-07-25
程浩 小鼠特有细胞Marker的选择 查阅文献时,不少文献提到小鼠独有的 F4/80 、 NK1.1 、 CD90.1 / CD90.2 、 CD45.1 / CD45.2 ,您是否对这些特有的指标感到疑惑?为什么有的小鼠用这个指标,有的用那个指标?这些指标该怎么选择?另外,小鼠CD16/32表面Fc受体是怎么回事,要怎么封闭,这期流式课堂就让带大家一起解答吧。 F4/80-成熟小鼠巨噬细胞标志物 F4/80 又称EMR1或Ly71,... 流式课堂 2023-07-19
程浩 PMA刺激对CD4检测的影响及解决办法 一直以来,很多老师在检测Th1/Th2/Th17等细胞的时候,都会有一个困扰,就是 直接检测CD4的时候,细胞分群很好,但是为了检测细胞因子,需要用PMA刺激细胞后再检测CD4,刺激后的细胞就会发现CD4阴阳性细胞群分不开了 。 出现这种现象的原因是什么呢?有哪些解决办法呢?今天我们一起来探讨吧! PMA刺激前 PMA刺激后 图1. PMA刺激前后人外周血CD4表达情况 其实,早在1990年就有学... 流式课堂 2023-07-12
程浩 FcR简介及其对流式实验结果的影响 抗体是Y字形分子,分为Fab端和Fc端。Fab端是与目标分子特异性结合的区域,Fc端是Ig与效应分子或者细胞相互作用的部位。 图一:抗体的结构 Fc受体(FcR)是免疫调节受体中非常重要的受体,主要在先天免疫细胞上表达,能识别并结合抗体的Fc端,引发免疫应答。 按FcR所结合的Ig种类不同可将其分为五类,即 IgG(FcγR)、IgE(FcεR)、IgA(FcαR)、IgM(FcμR)和IgD(F... 流式课堂 2023-05-30
程浩 流式中的隐秘参数-Time应用分享 今天为大家介绍一个在 流式实验 中非常重要,但却常常被忽视的一个参数—Time。 什么是Time? Time即“时间”— 通常与其他参数共同使用,反映该参数在上机过程中的实时变化情况 。这可以给我们带来非常多的信息,让我们在上机时能够获得更加准确全面的分析结果。下面我们就一起来看看Time参数具体的使用场景吧! 首先是在液流稳定性检测上的应用 。相信大家在做流式实验时都听说过液流稳定性的重要性。在... 流式课堂 2023-05-16
程浩 巨噬细胞简介及指标选择 巨噬细胞(Macrophage, M)是天然免疫系统特化的、存活时间长、具有吞噬作用的细胞。 巨噬细胞参与细胞碎片和病原体的识别、吞噬和降解。巨噬细胞还在向T细胞提呈抗原以及诱导其他抗原呈递细胞表达共刺激分子等方面发挥作用,从而启动适应性免疫反应。 骨髓中巨噬/树突状细胞前体可分化为Ly6C + CX 3 CR1 lo CCR2 + CD62L + 和Ly6C lo CX 3 CR1 hi CCR... 流式课堂 2023-03-28
程浩 如何通过光谱图选择合适的检测通道? 面对种类繁多的 荧光染料 ,如何知道这些荧光素是否适合您所拥有的流式细胞仪,以及每种荧光素具体该选择哪个检测通道进行检测呢?这需要我们对所用的荧光素和用于检测的流式细胞仪有清晰的认识。 我们需要关注 荧光素的激发波长和发射波长 ,以及 流式细胞仪的激光器和滤光片参数 ,其中,激发波长和激光器决定了目的荧光素能否在特定配置的流式细胞仪上被激发,发射波长和滤光片参数决定荧光素的荧光能否在该流式细胞仪上... 流式课堂 2023-03-14
程浩 双指数与对数在流式数据分析中的应用 本文重点介绍 流式结果 中坐标轴的显示方式、对数和双指数的转换及坐标轴的调整。 常用的三种流式图的坐标轴显示方式,包括Linear(线性),Logarithmic(对数),Biex(双指数),如图1。 图1:小鼠脾脏样本,三种坐标轴结果 左:FSC和SSC坐标轴均为Linear(线性) 中:SSC坐标轴为Linear(线性);CD3坐标轴为Logarithmic(对数) 右:SSC坐标轴为Line... 流式课堂 2023-02-28
程浩 抗体滴定如何做?一文全解析 使用 流式抗体 时,抗体浓度是最关键的参数。新手老师随意添加,容易产生背景染色过深、样本浪费等问题。为了达到更好的实验效果,节约宝贵的样本,我们需要进行抗体滴定。 1 什么是抗体滴定 抗体滴定,是做流式实验之前,对所用流式抗体进行最佳的抗体用量和抗体浓度测定的实验,其目的是 实现最优的信噪比 ,并且在多指标流式检测实验之前,对抗体配色发挥重要作用。 2. 为什么要做抗体滴定 一般情况下,生产厂家都... 流式课堂 2022-12-28
程浩 粘连体对流式实验结果的影响及排除方法 粘连体,是指 两个或更多个细胞粘在一起 (大多数是两个)的现象。 理想状态下,细胞是一个一个通过流式细胞仪激光照射区的。细胞通过激光照射区所产生的荧光信号被PMT接收,转化成电脉冲信号,如图所示: 从细胞进入激光照射区到离开,电脉冲信号由0到达峰值,再降回0,被记录为一个峰值。 H是脉冲高度,代表脉冲信号的峰值,W是脉冲宽度,是指细胞通过激光照射区域的时间,A是脉冲信号的面积。 现实情况下,由于各... 流式课堂 2022-09-28
程浩 易被忽略的CD4、CD8共表达细胞-胸腺淋巴细胞 做过流式实验的同学,对CD4、CD8这两个指标都不会陌生。检测CD4+ T细胞和CD8+ T细胞分型,是 流式 中最常见的实验之一。 通常,我们会先检测CD3,来圈总T淋巴细胞,再分别用CD4抗体和CD8抗体,来区分CD4+ T淋巴细胞(辅助或调节性T细胞)和CD8+ T淋巴细胞(细胞毒性T细胞)。 新生小鼠脾脏细胞 上图为新生小鼠脾脏细胞进行的CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC三色流... 流式课堂 2022-09-15