程浩 细胞核内因子染色流程 一、样本准备 详见 流式细胞术样本制备技术 1. 收集细胞,200目筛网过滤,收集滤液,300×g离心5 min,弃上清。 2. 向细胞中加入适量Cell Staining Buffer [E-CK-A107] ,用移液枪轻轻吹打细胞重悬。 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为1 × 10 7 /mL。 三、设置实验分组 根据实验设计,设置实验分组,每管加入100... 实验指南及答疑 2022-12-07 流式细胞术
程浩 Annexin V常见问题分析及解决方案 不久前,发布了文章: Annexin V凋亡实验注意事项 (点击查看) , 给大家讲解了Annexin V实验中的注意事项,好多同学跟反馈说,这些细节问题我在实验的时候都注意了,但实验结果还是很不理想。 出现异常实验结果时,我们该怎么办呢? 我们需要认真对待失败的实验数据,分析总结实验失败的可能原因,这样才能有针对性地重新实验,得到理想的实验结果。 本篇文章将结合多年实验经验,为 大家带来Anne... 实验指南及答疑 2022-11-29 细胞功能研究
程浩 血清or血浆?ELISA指标检测样本如何选 做ELISA实验时, 检测的指标是用血清样本好还是用血浆样本? 先给出结论,我们在判定指标检测时: 凝血功能类指标的检测 最好选择 血浆 , 免疫类指标的检测 最好选择 血清 。对于其他类型指标,包括细胞因子的变化等,通常情况下血清或血浆都可以选择。 血清与血浆的区别 ◇ 血清中无纤维蛋白原和某些凝血因子; ◇ 血清中无参与凝血的血浆蛋白; ◇ 血浆中无一些凝血过程中血小板释放的物质。 Tips:... 实验指南及答疑 2022-11-25 ELISA研究
程浩 Annexin V凋亡实验注意事项 Annexin V是检测细胞早期凋亡的常用方法之一。实验操作虽然不算难,想要获得漂亮的流式结果图却并不容易,任何一个细节的疏忽都可能导致实验结果不理想。本篇文章带大家了解 Annexin V 实验过程中的注意事项,及不能忽视的实验细节 。 01 实验原理 Annexin V是一种分子量为35~36kD的 Ca 2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与磷脂酰丝氨酸(PS)高亲和力特异性结合 。在细胞凋亡早期,... 实验指南及答疑 2022-11-15 细胞功能研究
程浩 ELISA标曲异常的原因及对策(下) 前段时间,我们发布了文章 ELISA标曲异常的原因及对策(上) (点击查看),今天继续跟大家分享在实验过程中遇到的 ELISA标曲异常的相关案例,并详细解释其原因和对策,助力大家顺利开展实验。 例5:显色正常,OD无法读值 标准品浓度 (pg/mL) OD 1000 2.579 2.397 500 1.835 1.786 250 1.161 1.244 125 0.657 0.704 62.5 0... 实验指南及答疑 2022-11-09 ELISA研究
程浩 ELISA标曲异常的原因及对策(上) ELISA实验中,标曲不仅能够帮助我们计算出样本浓度,还是指示实验人员操作手法是否规范的重要标志。 问: 如何判断我绘制的标准曲线是否有效呢? 答: 在显色阶段,控制标准品 前4孔有 明显的蓝色梯度 ,以及标准品 最大OD值≥1.2 ,标准曲线的线性回归相关系数 R 2 ≥0.99 ,即可作为有效标曲。 但是,在ELISA实验过程中,往往有 标曲异常 的情况出现,下面将介绍几种 特殊情况 ,并将其... 实验指南及答疑 2022-10-26 ELISA研究
程浩 ELISA不同色彩背后,藏着哪些特殊秘密? ELISA又称酶联免疫吸附测定,自1971年问世至今,已成为 定量检测体液中各种靶标蛋白含量的常用方法。 ELISA呈色反应可进行定性或定量分析,利用HRP酶催化TMB,反应产生蓝色亚胺溶液,加入终止液后,使蓝色阳离子转变为黄色的联苯醌。 图:辣根过氧化物酶催化氧化3,3',5,5' -四甲基联苯胺 [1] 除了常见的蓝色和黄色,ELISA实验过程中,也会出现一些不同寻常的多样色彩。每种颜色背后,... 实验指南及答疑 2022-10-11 ELISA研究
程浩 检测实验样本中的靶蛋白,ELISA、WB、IHC应该选哪个? 酶联免疫吸附测定(ELISA)、蛋白免疫印迹(WB)、免疫组化(IHC) , 是免疫学三大常用工具,应用于 目的蛋白的定量、定性和定位分析。 这三种免疫学检测手段,都是基于抗原与抗体特异性结合的原理,其差异性在于: ◆ ELISA 更适合定量检测胞外的分泌性蛋白 ◆ WB 多用于胞膜、胞浆或胞核蛋白的半定量检测 ◆ IHC 主要用于胞蛋白的定位 在实验技术方面,Elabscience ® 已有13... 实验指南及答疑 2022-09-26 ELISA研究
程浩 铁死亡研究-细胞亚铁检测常见问题解答 细胞亚铁含量增多是铁死亡区别其他细胞死亡方式的一个主要特征,其检测也是铁死亡研究最常见的指标之一。根据市场热点反馈,Elabscience ® 加大研发、优化力度,专门推出了 针对细胞样本的高灵敏度 亚铁离子比色法测试盒 (点击蓝色文字,查看产品详情) 下面整理了一些关于细胞亚铁检测的常见问题,助力大家更顺利地完成实验。 Q1:检测细胞亚铁需要多少细胞? 本试剂盒每个样本需准备大约 10 6 个细... 实验指南及答疑 2022-09-26 细胞代谢研究
程浩 ELISA实验FAQs 之试剂盒、样本、数据处理 本文主要介绍ELISA试剂盒、实验样本、ELISA数据处理相关问题,帮助大家更好地开展实验 试剂盒 Q1:科研试剂盒与临床试剂盒的区别 ? A1: 临床试剂是经过权威机构认可的,如FDA、CFDA等;而科研试剂一般是厂家自主研制,不需要通过权威机构验证。 经营临床诊断类产品的机构需要取得《医疗器械经营企业许可证》;经营科研试剂的机构不需要此证件。 临床试剂盒一般仅用于检测人血清/血浆等较为单一的分... 实验指南及答疑 2022-09-16 ELISA研究
程浩 7个小妙招,教你如何选ELISA试剂盒 市面上的ELISA试剂盒五花八门,质量良莠不齐。 如何浪里淘金,选择既符合科研需求,又品质上乘的ELISA试剂盒呢? Elabscience教你七招,快速搞定ELISA试剂盒的选择! 01 查找待测样本的蛋白浓度 通过检索SCI文献、Genecards、Mayocliniclabs等,获得目标蛋白的表达部位及表达浓度参考值, 比较ELISA试剂盒中给出的样本测值与参考值是否一致。 02 明确试剂盒... 实验指南及答疑 2022-09-15 ELISA研究
程浩 ELISA实验FAQs之实验结果OD值偏高 在往期文章中《 ELISA实验FAQs之实验结果OD值偏低 》,已经帮大家汇总了ELISA实验结果OD值偏低的问题分析和解决方案,相信大家一定收获满满。 除了上述问题,大家对ELISA实验结果OD值偏高的问题是否存在困惑呢?不要慌!咱们这就将 ELISA实验结果OD值偏高 的原因和对策一一道来,助力大家顺利完成实验数据分析。 整体OD值偏高 可能原因 相应对策 a. 试剂盒组分被污染 使用新的试剂... 实验指南及答疑 2022-09-15 ELISA研究