潘玲帆 免疫细胞 | 流式多因子检测：多指标检测新纪元 细胞因子是一类具有广泛生物学活性的小分子，包括白介素、肿瘤坏死因子、干扰素、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。流式多因子检测技术具有高效率和精确性的特点，是疾病诊断和免疫研究的有力工具。 一、 细胞因子的功能 细胞因子主要由免疫细胞分泌，并具有调节先天免疫和适应性免疫、免疫细胞生成以及损伤组织修复等多种功能。多种疾病进程中，在评估免疫系统及免疫细胞的功能时，细胞因子具有重要的参考作用。例如，在新... 流式课堂 2024-08-13
潘玲帆 超全解析！荧光标记原理及影响荧光标记的因素 做流式的老师，肯定都对带荧光标记的 流式抗体 不陌生。在检测一些特殊的指标时，有时没有合适的荧光标记抗体，需要自己先标记抗体，再用带有荧光标记的抗体摸索抗体的应用方向。今天给大家带来 荧光标记原理及影响荧光标记的因素 介绍，让各位老师更加了解荧光标记实验，在做实验时能够更加得心应手。 一、荧光标记原理 抗体的化学本质是蛋白质，蛋白质是由氨基酸以脱水缩合的方式形成的。自然界中的氨基酸有几百种，但生物... 流式课堂 2024-07-11
潘玲帆 小鼠骨髓来源树突状细胞的培养和鉴定 树突状细胞（Dendritic Cells, DC）来源于骨髓，是功能最强大的抗原递呈细胞，在先天免疫和后天免疫系统之间起着通道的作用。DC细胞是唯一能够显著刺激初始T细胞（NAIVE T细胞）增殖的APC（Antigen Presenting Cells，抗原呈递细胞），其他APC（如B细胞和单核巨噬细胞等）仅能刺激已活化的效应T细胞或记忆T细胞。DC细胞是机体T细胞适应性免疫应答的始动者，在肿... 流式课堂 2024-06-26
冯忠 流式配色原则总结篇 前几期我们详细介绍了 流式配色原则 ，今天再一起总结回顾吧。 流式配色原则（一）—强弱搭配 ， 即弱表达抗原搭配强荧光染料，强表达抗原搭配弱荧光染料 。搭配时要注意，抗原密度一定是在细胞亚群水平上确定的，抗原密度也会由于激活状态而有所改变。Marker的表达量可以参考相关资料或者文献来确定，荧光染料的强弱可以参考下表，或者通过染色指数判断。 图1. 荧光素种类 流式配色原则（二）—荧光干扰 ： 弱... 流式课堂 2024-06-06
冯忠 流式配色原则第五课：子代与亲代 之前，我们逐一学习了 流式配色 的四大原则： 强弱搭配 、 荧光干扰 、 互斥抗原 、 共表达抗原 （点击回顾），今天我们一起来了解一下多色流式配色六大法则中的第五条—— 允许子代对亲代的荧光溢漏，反之不行 。这条原则指的是 如果需要配色的抗原之间是子代与亲代的关系，可以允许子代对亲代有荧光溢漏，同时要避免亲代对子代的溢漏。 子代与亲代是指抗原之间是上下级关系，即下级抗原是在上级抗原的基础上进行分... 流式课堂 2024-05-29
潘玲帆 流式配色原则第四课：共表达抗原 前面几期流式课堂，我们一起学习了 流式配色 的三大原则—— 强弱搭配 、 荧光干扰 、 互斥抗原 （点击回顾），今天来看第四个原则—— 共表达的抗原避免溢漏 。这条原则指的是 配色时要注意抗原之间的相互关系，如果抗原间是共表达关系，要避免荧光溢漏对共表达抗原的影响 。 抗原间的相互关系分为三种，分别是 互斥关系 、 子代与亲代的关系 和 共表达关系 。 互斥关系是指两种抗原不会同时表达在一种细胞上... 流式课堂 2024-05-23
冯忠 流式配色原则第三课：互斥抗原 前期，我们学习了 流式配色原则 ： 强弱搭配 、 荧光干扰 （点击蓝字回顾），今天继续学习第三大原则—— 互相排斥的抗原允许溢漏 ，指的是 配色时要注意抗原之间的相互关系，如果是互斥关系，则可以使用高干扰组合 。 由于流式细胞仪通道数量有限，再加上多色流式实验时同时检测指标较多，我们不可避免地会使用高干扰荧光组合。如何使高干扰荧光组合对抗原检测的影响降到最低呢？这时我们可以考虑抗原间的相互关系， ... 流式课堂 2024-04-24
冯忠 流式课堂|流式配色原则第二课：荧光干扰 上期推文带来了 流式配色原则第一课：强弱搭配 。今天继续为大家介绍多色流式配色六大法则中的第二条— 弱表达抗原放在无干扰通道，强表达抗原放在不干扰其它通道的通道 ，指的是 配色时要注意避免对弱表达抗原的荧光干扰及强表达抗原对其它指标的荧光干扰 。 说到荧光干扰，就得说下什么是荧光溢漏。荧光溢漏是指荧光染料的信号溢出到其它的通道，这是由荧光染料发射和仪器光学设置产生的问题。 荧光溢漏的原因分三点 ：... 流式课堂 2024-04-17
冯忠 流式配色原则第一课：强弱搭配 流式配色好难啊，我总是翻车…… 别慌！接下来几期流式课堂文章将详细分析 流式配色原则 ，助力大家 的多色流式实验。今天先来看第一期流式配色原则解读： 强弱搭配 。 弱表达抗原搭配强荧光染料，强表达抗原搭配弱荧光染料 ，这是多色流式配色六大法则中的第一条，指的是目标Marker表达量和荧光素的强度要做到 强弱搭配 。 如果强表达抗原搭配强荧光染料，弱表达抗原搭配弱荧光染料，刚好强荧光对弱荧光有干扰的... 流式课堂 2024-04-17
冯忠 免疫细胞|肥大细胞简介及指标选择 什么是肥大细胞？ 肥大细胞（Mast Cell）广泛分布于皮肤及内脏粘膜下的微血管周围，能分泌多种细胞因子，参与免疫调节（T、B细胞，APC细胞活化），表达MHC分子、B7分子，具有APC功能，也表达大量的IgE Fc受体，释放过敏介质。肥大细胞具有 弱的吞噬功能 ，和血液的嗜碱粒细胞同样为具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。基于细胞的组织分布，可将肥大细胞分为 结缔组织型肥大细胞 （CTMC）和 粘膜型... 流式课堂 2024-01-23
冯忠 粒细胞简介及指标选择 粒细胞由骨髓中的造血干细胞分化而成，是一种胞质中有特殊颗粒的白细胞。作为天然免疫细胞，粒细胞在病毒和寄生虫感染、过敏反应、慢性炎症、哮喘、免疫调节、自身免疫和癌症等多种疾病中都发挥着重要的作用。 现分别从 粒细胞的分类 、 粒细胞的生长发育 、 粒细胞流式分析的指标 选择三个方面对粒细胞进行详细的阐述。 粒细胞的分类 根据形态和功能的差异，分为 嗜中性粒细胞 、 嗜酸性粒细胞 、 嗜碱性粒细胞 和... 流式课堂 2023-12-26
冯忠 免疫细胞 | NK细胞简介及指标选择 免疫系统就像是人体的护卫队，默默地守护着我们的健康。而组成这支护卫队的则是免疫细胞，它们一方面发挥着清除细菌、病毒、外来异物的功能；另一方面消除体内衰老细胞以及发生突变的细胞，为健康奠定基础，是“人体最好的医生”。 图1. 免疫系统的成员 NK细胞、T细胞、B细胞等都属于免疫系统的成员，在之前的 流式课堂 中，我们介绍了 Th1/Th2/Th17 和 Treg 细胞及其指标选择，今天给大家简要介绍... 流式课堂 2023-12-25