程浩 巨噬细胞简介及指标选择 巨噬细胞(Macrophage, M)是天然免疫系统特化的、存活时间长、具有吞噬作用的细胞。 巨噬细胞参与细胞碎片和病原体的识别、吞噬和降解。巨噬细胞还在向T细胞提呈抗原以及诱导其他抗原呈递细胞表达共刺激分子等方面发挥作用,从而启动适应性免疫反应。 骨髓中巨噬/树突状细胞前体可分化为Ly6C + CX 3 CR1 lo CCR2 + CD62L + 和Ly6C lo CX 3 CR1 hi CCR... 流式课堂 2023-03-28
程浩 如何通过光谱图选择合适的检测通道? 面对种类繁多的 荧光染料 ,如何知道这些荧光素是否适合您所拥有的流式细胞仪,以及每种荧光素具体该选择哪个检测通道进行检测呢?这需要我们对所用的荧光素和用于检测的流式细胞仪有清晰的认识。 我们需要关注 荧光素的激发波长和发射波长 ,以及 流式细胞仪的激光器和滤光片参数 ,其中,激发波长和激光器决定了目的荧光素能否在特定配置的流式细胞仪上被激发,发射波长和滤光片参数决定荧光素的荧光能否在该流式细胞仪上... 流式课堂 2023-03-14
程浩 双指数与对数在流式数据分析中的应用 本文重点介绍 流式结果 中坐标轴的显示方式、对数和双指数的转换及坐标轴的调整。 常用的三种流式图的坐标轴显示方式,包括Linear(线性),Logarithmic(对数),Biex(双指数),如图1。 图1:小鼠脾脏样本,三种坐标轴结果 左:FSC和SSC坐标轴均为Linear(线性) 中:SSC坐标轴为Linear(线性);CD3坐标轴为Logarithmic(对数) 右:SSC坐标轴为Line... 流式课堂 2023-02-28
程浩 组织单细胞悬液制备中各种酶的特性及应用场景 组织由细胞和细胞外基质(ECM)有序而紧密地联结在一起。从组织中获取单细胞悬液,应用于流式检测、单细胞测序、体外培养、药物筛选、细胞移植、类器官培养以及肿瘤研究等方面,更接近体内的天然状态,具有很多优势。 要想获得高品质的单细胞悬液,需要采取一些有效措施,其中, 酶消化法 就是一种既能维持细胞的最佳状态、又能有效地获得单个细胞的方法。 消化组织的酶多种多样,常见的消化酶主要有以下几种。根据消化原理... 样本制备指南 2023-02-02
程浩 抗体滴定如何做?一文全解析 使用 流式抗体 时,抗体浓度是最关键的参数。新手老师随意添加,容易产生背景染色过深、样本浪费等问题。为了达到更好的实验效果,节约宝贵的样本,我们需要进行抗体滴定。 1 什么是抗体滴定 抗体滴定,是做流式实验之前,对所用流式抗体进行最佳的抗体用量和抗体浓度测定的实验,其目的是 实现最优的信噪比 ,并且在多指标流式检测实验之前,对抗体配色发挥重要作用。 2. 为什么要做抗体滴定 一般情况下,生产厂家都... 流式课堂 2022-12-28
程浩 细胞核内因子染色流程 一、样本准备 详见 流式细胞术样本制备技术 1. 收集细胞,200目筛网过滤,收集滤液,300×g离心5 min,弃上清。 2. 向细胞中加入适量Cell Staining Buffer [E-CK-A107] ,用移液枪轻轻吹打细胞重悬。 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为1 × 10 7 /mL。 三、设置实验分组 根据实验设计,设置实验分组,每管加入100... 实验指南及答疑 2022-12-07
程浩 人外周血PBMC制备 本视频为人外周血 PBMC 制备的常规操作流程;主要展示用 Ficoll 分离液提取 PBMC 的方法;同时备注实验中需要注意的细节;以便更好的帮助实验者理解 PBMC 样本制备实验。(注:不同厂家的 Ficoll 分离液操作步骤可能会不同;实验时请参考说明书)... 实验操作视频 流式抗体 2022-10-31
程浩 粘连体对流式实验结果的影响及排除方法 粘连体,是指 两个或更多个细胞粘在一起 (大多数是两个)的现象。 理想状态下,细胞是一个一个通过流式细胞仪激光照射区的。细胞通过激光照射区所产生的荧光信号被PMT接收,转化成电脉冲信号,如图所示: 从细胞进入激光照射区到离开,电脉冲信号由0到达峰值,再降回0,被记录为一个峰值。 H是脉冲高度,代表脉冲信号的峰值,W是脉冲宽度,是指细胞通过激光照射区域的时间,A是脉冲信号的面积。 现实情况下,由于各... 流式课堂 2022-09-28