程浩 小鼠特有细胞表面Marker的选择 查阅文献时,不少文献提到小鼠独有的F4/80、NK1.1、CD90.1/CD90.2、CD45.1/CD45.2,您是否对这些特有的指标感到疑惑?做同样的细胞模型,为什么有的小鼠用这个指标有的小鼠用那个指标?这些指标该怎么选?另外小鼠CD16/32表面FC受体是怎么回事,怎么使用?就让我一起为大家解答吧! F4/80-成熟小鼠巨噬细胞标志物 F4/80是一种160kd的糖蛋白。它是表皮生长因子(E... 产品选购指南 2021-12-17
程浩 流式抗体到底怎么选?要注意哪些问题? 流式细胞术是一项非常实用的技术,其特点是方便快捷,结果准确,且能成功的对目标细胞进行分选,但是提起流式抗体具体要怎么选,估计很多小伙伴都会犯难,确实,想获得一个漂亮的流式结果图没有那么容易,实验前最需要考虑的是抗体的选择和荧光素的搭配。 选流式抗体需注意哪些问题? 抗体的基本要求 a. 清楚知道待测靶标是胞内还是胞外蛋白; b. 严格按照样品来源选择抗体反应性; c. 必须选择明确标注可用于流式实... 产品选购指南 2019-07-24
程浩 如何选择流式抗体 高质量、可靠的荧光抗体,是顺利完成流式检测及其相关数据分析的保障,尤其是基于荧光补偿、对分辨率要求较高的多色流式检测。如何选择优质的荧光抗体进行流式细胞术呢?以下是一些关键因素。 三大要素 1. 常用克隆编号 对于特定的细胞表面抗原CD家族蛋白,通常会有多种不同克隆号的单抗。流式细胞实验中使用的克隆号越常见,实验获得成功的几率也大。 2. 高染色指数 高染色指数有利于阳性和阴性细胞群的分离,特别是... 产品选购指南 2018-10-30
程浩 血液中免疫细胞的流式分型 免疫系统是机体抵御外来入侵、清理自身异化细胞或组织的重要组成部分,关乎生物的健康与生存,一直以来是生物学和医学研究的重点和热点领域。在机体的生理和病理过程时,免疫细胞通过脉管系统和血液循环从淋巴器官抵达全身,对血液中免疫细胞的流式分析是生物学和医学研究中最常用的了解机体免疫状态的检查手段之一。血液中的细胞主要分为红细胞(Erythrocytes/Red Blood Cells)和白细胞(Leuko... 流式课堂 2018-08-20
程浩 细胞内因子染色步骤 一、样本准备 详见 流式细胞术样本制备技术 1. 收集细胞,200目筛网过滤,收集滤液,300×g离心5 min,弃上清。 2. 向细胞中加入适量Cell Staining Buffer [E-CK-A107] ,用移液枪轻轻吹打细胞重悬。 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为1 × 10 7 /mL。 三、设置实验分组 根据实验设计,设置实验分组,每管加入100... 实验指南及答疑 2018-08-01
程浩 流式细胞表面染色步骤 一、样本准备 详见 流式细胞 术样本制备技术 1. 收集细胞,200目筛网过滤,收集滤液,300 g离心5 min,弃上清 2. 向细胞中加入适量细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS),用移液枪轻轻吹打细胞重悬 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为1 × 10 7 /mL 三、设置实验分组 实验分组 作用 阴性/空白对照 调节仪器电压 单染/单阳对照 调节... 实验指南及答疑 2018-08-01
程浩 流式实验常见问题及解决方案 1.无染色/弱染色 可能的原因 解决方法 抗体贮存和操作不当 抗体应保存在2-8℃中,避光保存,同时避免反复冻融 荧光染料淬灭 荧光抗体和荧光抗体染色后的样本都应该避 光保存 自发荧光较高 改变抗体的荧光染料形式,避开与自发荧光相同发射光或者补偿较大的染料 染色时间和温度不正确 适当调整染色时间和温度 使用错误的染色液染色细胞内蛋白 为了获得最佳细胞内蛋白染色,应该使用正确的固定破膜剂进行细胞固定... 实验指南及答疑 2017-12-23
程浩 流式细胞术实验流程 流式细胞技术(Flow cytometry, FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物,它能有效地从单细胞水平区分异质性细胞群体,检测对象包括但不限于悬浮细胞、贴壁细胞或从实体组织分离的单细胞悬液和其他生物颗粒。 一、细胞表面染色步骤 1. 样本准备 1.1 采集全血或组织(脾,淋巴结... 实验指南及答疑 2017-12-22
程浩 多色流式实验荧光染料的选择 如今,流式细胞术已经成为一项功能强大的技术,可在数秒内对数千个单个细胞或其他颗粒的多项参数进行分析。在流式细胞分析中,荧光染料受到一定波长的激光激发后,释放出的能量能发射出一定波长的荧光,因此我们在选择荧光染料时应注意它们的激发波长和发射波长,以选择正确的激光器和荧光染料组合。随着多色流式细胞仪的出现,新荧光染料和标记抗体也得到了长足发展。然而荧光染料的发射光谱并不是与流式细胞仪的检测通道完美对应... 产品选购指南 2017-12-19