程浩 ELISA实验FAQs之实验结果OD值偏低 ELISA是一个非常严谨、极其考验操作者技巧和经验的实验,检测结果数值低、标准曲线梯度差、背景值高、变异系数大等诸多问题也是兵家常事。 本文将常见的 ELISA实验结果OD值偏低 的原因及对策进行了汇总,具体如下! 整体OD值偏低或无信号 可能原因 相应对策 ● 试剂盒组分失活 使用新的试剂盒,按照说明书要求保存试剂盒 ● 试剂盒组分未平衡 试剂盒每个组分都需要平衡至室温后进行实验 ● 试剂混用或... 实验指南及答疑 2022-09-09 ELISA研究
程浩 Annexin V实验对照设置 Annexin V实验对照设置 Annexin V 是常用的检测细胞凋亡的方法,一般通过流式细胞仪来检测。为保证实验结果的准确性,方便后续数据分析,通常需要设置不同对照实验组。 ①样本不带自发荧光 : 组别 Annexin V 核染料 样本类型 空白对照 - - 不做任何处理的细胞 生物学对照 + + 不做任何处理的细胞 单阳对照 1 + - 有明显凋亡的细胞 单阳对照 2 - + 有明显凋亡的细... 实验指南及答疑 2022-09-07 细胞功能研究
程浩 铁死亡常见FAQs h4{ font-size:14px; font-weight:bold; margin-top:15px; } 1. 铁死亡研究一般是检测总铁还是亚铁含量? 铁死亡研究测总铁和亚铁的都有,但更多科研者趋向于检测亚铁含量,因为铁死亡的特征有游离亚铁离子超载和脂质过氧化物累积。 2. 细胞亚铁比色法测试盒,这个试剂盒在细胞亚铁含量计算时,可以通过测蛋白的方式来计算吗? 使用细胞亚铁比色法测试盒时,在... 实验指南及答疑 2022-08-04 细胞代谢研究
程浩 流式配色基本原则 流式细胞实验操作其实是非常简单的一个实验: 样本制成单细胞悬液+抗体加进去染色 实验就做完了 对于大多数新手来说 流式细胞实验前的指标选择和配色才是大家关注的重点 很多人通过文献知道自己要做什么指标 但不理解文献里面为什么要这样配色 是基于什么原因来做配色方案的? 下面,我们为大家带来“流式配色基本原则” 流式配色遵循以下基本规则: 强弱搭配 选择干扰少的荧光组合 使分析的复杂程度降到最低 谨慎使... 实验指南及答疑 2022-03-14 流式细胞术
程浩 怎么选择合适的TUNEL 凋亡检测试剂盒 市面上常见的TUNEL产品主要有2大类,一类是 荧光TUNEL产品 (适用于荧光显微镜检测) ,一类是 DAB显色TUNEL产品 (适用于普通光学显微镜检测) 。在选择TUNEL产品时,首先要考虑自己的实验室的显微镜属于哪种。 对于有荧光显微镜的实验室,我们推荐使用荧光TUNEL产品,荧光TUNEL产品跟DAB显色TUNEL产品相比有以下优势: (1)实验时间短 (2)操作简便 (3)结果易观察 ... 实验指南及答疑 2021-06-08 细胞功能研究
程浩 Annexin V 凋亡试剂盒常见问题 Q: Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A: Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记荧光染料如FITC利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或7-AAD可与双链DNA特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下... 实验指南及答疑 2020-11-12 细胞功能研究
程浩 免疫荧光试剂盒操作指南 免疫荧光染色试剂盒(Immunol Fluorence Staining Kit)系列是Elabscience®开发的用于细胞或组织切片检测免疫荧光染色的试剂盒。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时,就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。 推荐Elabscience®的免疫荧光染色的试剂盒 E-IR-R321 免疫荧光染色试剂盒-抗兔Cyanine3 E-IR-R322 免疫荧光... 实验指南及答疑 2019-12-21 蛋白抗体资源
程浩 细胞周期检测实验步骤及注意事项 很多人在做细胞周期检测实验的时候,往往需要摸索较长时间条件才能得到稳定可靠的结果,这其中涉及到的因素比较多,为方便大家稳定可靠地获得理想数据,今天为大家详细介绍一下细胞周期检测实验的原理、流程以及注意事项。 细胞周期是指细胞从一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,分为间期与分裂期两个阶段。如下图: G0期: 这一期的细胞称为休眠细胞,细胞暂时脱离分裂周期,不进行DNA复制和分裂。但这些细胞... 实验指南及答疑 2019-08-12 细胞功能研究
程浩 细胞增殖和细胞毒性(CCK-8法)原理和经验总结 一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。... 实验指南及答疑 2019-07-10 细胞功能研究
程浩 Caspase活性检测系列(分光光度法)检测原理及操作指南 一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至... 实验指南及答疑 2019-07-10 细胞功能研究
程浩 流式细胞仪检测线粒体膜电位 一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产... 实验指南及答疑 2019-07-10 细胞功能研究
程浩 TUNEL检测细胞凋亡原则及经验总结 一、TUNEL法的实验原理 细胞发生凋亡时, 染色体DNA双链或单链断裂产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transfera... 实验指南及答疑 2019-07-10 细胞功能研究