往期文章中，已讲解了 单阳对照 和 同型对照 的作用。可以先回顾和总结一下， 流式对照的设计和用途： 实验分组 作用 阴性/空白对照 调节仪器电压 单染/单阳对照 调节补偿 同型对照 消除背景染色 FMO对照 保证设门的准确性 生物学对照 实验结果对比 实验组 实验结果 大部分老师做流式实验时，会用到空白对照、单阳对照、同型对照、生物学对照等，用到FMO对照的比较少。尽管如此，FMO对照在设置圈门...

实验过程中，老师们或许会有疑问：一个完整的 流式实验 中，到底需要几种对照，需要准备多少管样本来设置对照呢？ 下面，我们为大家总结 6种常见的流式对照设置，并以CD3-APC、CD4-FITC、CD8-PE三色实验为示例 ，为大家提供样本管设置参考。 01 空白对照——用于调节仪器电压 空白对照，即不添加任何荧光染料的对照管。 设置空白对照，是为了区分细胞本底的自发荧光，及判断药物处理等外界因素是...

#01 什么是同型对照？ 同型对照（Isotype Control），是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度，但对目标靶点无特异性结合的抗体 。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照？ 流式抗体与靶标的结合，是通过抗体的Fab端与靶标Marker进行特异性结合而完成的。白细胞（除T细胞外）表面大多表达CD16、CD3...

多色流式实验 中，由于不同荧光素的发射波长的覆盖范围不同，可能产生重叠，对实验结果的数据分析造成一定干扰，我们通常会设置单阳管进行调节补偿。同时，单阳管还可以辅助我们调节通道电压，防止信号超出接收范围。 图示：常见荧光素的发射光谱 A. 如何设置单阳管 单阳管即单染管，是只添加一种荧光抗体的样本管。 一般来说，实验panel有几种荧光，就需要设置几个单阳管。如：APC、PE、FITC的三色pane...

在《 人外周血调节性T细胞鉴定方案 》中，我们用到了CD45这个指标圈门。有疑问指出： 人外周血中，所有的白细胞表面都表达CD45，做外周血的样本不需要多此一举，去添加一个 CD45抗体 。通过FSC/SSC，就能直接圈出淋巴细胞亚群 。 做免疫细胞分型时，CD45真的可有可无吗？下面我们来聊一聊， CD45的特点，及通过CD45与SSC-H来圈出淋巴细胞亚群的意 义 。 CD45由一类结构相似、...

CD127 VS Foxp3 虽然Foxp3是目前公认的调节性T细胞最特异的指标，但因其位于细胞内，使得Foxp3的染色必须要固定细胞并破核膜，因此 这种方法并不适用于分离活的Tregs， 且该方法比较传统，操作相对复杂，稍有不慎就会影响实验结果 。 而CD127属于细胞表面Marker，无需固定破膜。因此，当前主流方向是通过CD127来检测人Tregs。 CD127的发现 CD127是2006年...

小鼠调节性T细胞 鉴定步骤 配色方案 细胞亚群 种属 指标 荧光标记 克隆号 Treg Mouse CD4 FITC GK1.5 CD25 APC PC-61.5.3 Foxp3 PE 3G3 小鼠调节性T细胞 鉴定所需 流式抗体 产品名称 荧光素 货号 规格 CD4 FITC E-AB-F1097C 100T CD25 APC E-AB-F1102E 20T Foxp3 PE E-AB-F123...

免疫系统是机体抵御外来入侵、清理自身异化细胞或组织的重要组成部分，关乎生物的健康与生存，一直以来是生物学和医学研究的重点和热点领域。在机体的生理和病理过程时，免疫细胞通过脉管系统和血液循环从淋巴器官抵达全身，对血液中免疫细胞的流式分析是生物学和医学研究中最常用的了解机体免疫状态的检查手段之一。血液中的细胞主要分为红细胞（Erythrocytes/Red Blood Cells）和白细胞（Leuko...