程浩 人外周血单细胞悬液制备流程及注意事项 人外周血单细胞悬液制备流程 1 . 采集人外周血样本于抗凝管中。 2. 离心管内加入100 μL新鲜血和2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃裂解10 min。 3. 300 g离心5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清,得到白色细胞沉淀。 4. PBS洗涤一次。 5. 加入100 μL细胞染色缓冲液重悬细胞,不用计数,即可进行后续流式抗体染色实验。按照100 μL新鲜血样本制... 样本制备指南 2022-06-07
程浩 人外周血PBMC的制备及注意事项 人外周血 PBM C 的制备流程 1. 收集抗凝人外周血,用1640无血清培养基或PBS按照1:1的比例稀释,上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 2. 在15 mL离心管中,先加入3 mL 充分混匀的Ficoll液(1.077 g/mL),再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液,血液和Ficoll液分层明显为成功。 注:Ficoll提前半小时从4℃冰箱取出恢复到室温,温度过高会导致分离不明显,温度... 样本制备指南 2022-06-07