内容预告： 本文 将和大家一起探讨IP（免疫沉淀）实验中的轻重链干扰问题，分析如何减少这种干扰 。 大家知道， 免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。 当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质A的抗体免疫沉淀A，那么与A在体内结合的蛋白质B也能沉淀下来。 目前多用精...

免疫沉淀 和免疫共沉淀，是许多蛋白质组学研究的重要步骤，用于检测蛋白质是否存在于样本中、测定蛋白的分子大小和相对丰度、确定蛋白丰度的上调和下调是否有效，及研究蛋白的稳定性、翻译后修饰、蛋白的相互作用等。免疫沉淀常和其它检测实验串联进行，如：IP-ELISA、IP-WB、IP-MS等。 免疫沉淀 免疫沉淀（IP）的原理，是将抗体与固相载体结合后，利用抗原抗体的特异性反应，从纯化混合物中富集目的蛋白的...

Western Blot虽是实验室最常用的蛋白分析技术，但是由于它步骤繁琐、操作流程长、影响因素多，所以，导致我们在做实验时会遇到各式各样的问题。今天我们总结了一些WB实验中经常遇到的各种“奇葩”条带问题，并为你推荐了常用的解决方法，希望对大家有所帮助。 一、 目标条带没有信号 原因分析 解决方法 样品中可能含有蛋白酶，使蛋白样品分解成小分子。 添加蛋白酶抑制剂。 目标蛋白浓度过低（低于检测下线）...

早些年的时候，PLoS One 与 Oncotarget、Medicine、Scientific Reports一起，被称为“毕业四大神刊”。 如今， Oncotarget被SCI剔除，Medicine发文量增长100多倍，影响因子腰斩再腰斩，滑到2分以下，“四大神刊”只剩下了两个——PLoS One与SR。 今年的影响因子报告中， SR微跌到4.011，PLoS One神奇地从2.766涨到了2...

大家在做实验的过程中，应该有过这种经历：好不容易千辛万苦通过大数据筛出来个肿瘤里阳性表达的基因，然后通过western blot，qPCR的检测也同样验证了其在癌组织里的表达水平要比癌旁要高很多，然而最后一步做了组织芯片的免疫组化，最后，竟然是“万里江山一片棕”! 这个时候，大家一般都开始怀疑自己哪里做错了，其实，小编偷偷告诉你：你可能是用错免疫组化的方法啦! 让我们首先了解一下免疫组化的小常识：...

科研实验离不开抗体，WB实验、免疫沉淀、免疫组化、免疫荧光、染色质免疫沉淀、流式细胞实验等等，都需要用到抗体，所以才说：抗体选得好，实验没烦恼。 然而，很多科研小伙伴都不知道如何挑选抗体，认为只要选择国际知名抗体公司就万事大吉了。其实不然，除了选择抗体品牌外，还需要从抗体的验证方法、是否有文献引用、图片是否真实以及冷链运输系统等多方面进行考量。 选择一款合适的抗体不是一件易事，况且现在抗体市场鱼目...

肝癌研究相关背景及意义 据GLOBOCAN 2018统计数据，2018年，全球肝癌新发病例84万，死亡数78万，是第六大常见癌症，也是第四大癌症死因。东亚地区特别是中国、日本与韩国为肝癌高发地区，其中中国每年新发肝癌病例约占全球的59%。流行病学研究资料表明，乙肝病毒(HBV)感染是我国肝癌高发的主要原因。我国肝癌发现迟，分期晚，患者的整体预后较差，5年生存率约为12.5%。 不可否认的是，免疫治...

应用 简称 描述 Activation Activ 将细胞从正常静息状态诱导到活性状态 Blocking Block 将细胞表面靶蛋白封闭阻断 Cell Separation Separation 通过正 / 负向选择分离特定的细胞群 Cell Separation by Negative Selection Cell Sep-Neg 通过负向选择分离特定的细胞群 Depletion Deplet...

Western Blot实验检测几乎就是一个“事倍功半”的过程：繁琐的步骤、大量时间精力以及相对较高的实验失败率所带来最好的回报也仅仅只是CV>35%的半定量结果。 做WB实验时，你是否遇到这些烦恼? 费时： 所需试剂均需单独购买，试剂查找、对比耗费大量时间; 费力： 所需试剂均需单独配制、调整配比、验证可用性; 费钱： 很多试剂一次用不完，造成浪费; 操作复杂： 每一步流程均需反复摸索合适的实验...