程浩 困扰5000万人的阿尔兹海默症,有何奥秘? 阿尔兹海默症( Alzheimer’s Disease,AD )俗称老年痴呆症,是由于神经细胞损失而导致的一种起病隐匿、不可逆的进行性神经系统退行性脑疾病,以记忆障碍、失语、失认等为主要症状。 目前,全球AD患者约有5000万人,中国患者占到其中的四分之一。阿尔兹海默症防治相关研究,一直是神经科学领域的重难点。 01 阿尔兹海默症的发病机制 迄今为止, AD的确切病因和发病机制尚不明确 。从发病人... 疾病专题 2022-03-31
程浩 竞争法ELISA操作视频 本视频为Elabscience®公司ELISA试剂盒(竞争法)的操作指南,对每一步的反应都做了演示,以便实验者能更好地理解ELISA实验的过程。 竞争法原理: 用抗原包被于酶标板上,同时加入生物素化特异性抗体和样本(标准品),实验时样品或标准品中的抗原会与包被的抗原竞争结合生物素化特异性抗体。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,游离的成分被洗去。结合在包被抗原上的生物素化特异性抗体以及亲和素形成免... 实验操作视频 酶联免疫吸附实验(ELISA) 2022-03-15
程浩 IL-6,至关重要的多功能细胞因子 白介素6(interleukin 6,IL-6),是与炎症相关最为典型的细胞因子。它通过调节免疫和炎症反应,在宿主防御中发挥着重要作用。 现在就来和大家聊聊,IL-6的起源、特性、功能与应用。 01 发现过程 上世纪70年代,IL-6最早被Kishimoto小组鉴定为由T细胞产生的可溶性蛋白,可激活B细胞分化为产生抗体的细胞,因此,它最初被称为B细胞刺激因子2(BSF-2)。 1986年,研究人员... 靶点解惑 2022-02-25
程浩 一篇文章带你系统了解癌症! 癌症是一组可影响身体任何部位的多种疾病的通称。使用的其它术语为恶性肿瘤和赘生物。癌症定义的一个特征是快速产生异常细胞,这些细胞超越其通常边界生长并可侵袭身体的临近部位和扩散到其它器官。后者被称之为转移。转移是癌症导致的一个主要死因。 问题 癌症是全世界一个主要死因,2015年造成880万例死亡。最为常见的癌症类型为: 问题癌症由何引起? 癌症源于正常细胞转变为肿瘤细胞的多阶段过程,通常从癌前病变发... 疾病专题 2018-03-16
程浩 HRP底物分类 底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DA... 实验指南及答疑 2017-09-02
程浩 ELISA实验操作要点 优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。 1. 标本的采取和保存 可用作 ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清... 实验指南及答疑 2017-09-02
程浩 生物素亲和素ELISA系统介绍 生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotin avidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使BAS标记技术比常规酶联免疫、放射免疫及荧光免疫技术有着更高的灵敏度,为微量抗原、抗体的检测开辟了新的途径。近年来,在BAS检测中多用链霉亲... 实验指南及答疑 2017-09-02
程浩 ELISA中的抗原与抗体的反应 抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链... 实验指南及答疑 2017-09-02
程浩 ELISA原理与分类 一、ELISA的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量... 实验指南及答疑 2017-09-02
程浩 ELISA常见问题 问题描述 可能原因 相应对策 精确度低 洗涤不完全 保证洗板机正常运行 保证充足的浸泡时间 拍板不完全 充分拍板至孔内无明显残留液体 试剂混合不充分 保证溶液充分混合 溶液被污染 重新配制溶液 标准品稀释不正确 稀释液作为空白值;保证用最高浓度标准品精确稀释 保证按正确倍比梯度稀释 标准曲线梯度差 洗涤不完全 保证洗板机正常运行 拍板不完全 充分拍板至孔内无残留液体 每孔加液体积不等 检查移液器 ... 实验指南及答疑 2017-08-31
程浩 移液时的注意事项 移液的一致性是实验重复性好的关键。移液时必须保持平稳、一致的速度。吸液和加液时要避免突然挪动移液器。 1. 检查移液器枪头,确保其正确安装在移液器末端。 2. 加不同的试剂和样品时需更换枪头。 3. 加液的体积不能少于说明书上建议的体积,否则会降低实验的准确性和重复性。 4. 一些溶液可能容易吸附在枪头的内壁或外壁,用样本或试剂来润洗枪头可降低或避免液体的表面张力,从而提高实验的准确性。 5.针对... 实验指南及答疑 2017-08-31
程浩 如何清洗ELISA酶标板 正确地清洗酶标板是成功完成 ELISA 实验的关键之一。稀释浓缩洗涤液时应使用去离子水或蒸馏水。 以下是正确清洗酶标板的注意事项: 使用多通道移液器 首先,检查酶标板确保其牢固放置于板架上。随后,翻转酶标板倾倒液体。按照说明书所示体积在每孔加入洗涤液。按照推荐的时间,计时器设置洗涤液浸泡时间。再次翻转酶标板倒出液体,用干净的吸水纸轻拍,将孔内液体拍干。按照说明书建议的次数重复以上步骤。最后一次在吸... 实验指南及答疑 2017-08-30