程浩 如何进行超声操作? 使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞(参考:用Soniprep150超声波发生器以振幅14μm超声处理30秒,破碎细胞;或者用超声破碎仪,200W,2秒/次,间隙3秒,总时间3-5分钟或者400A,5秒/次,间隙10秒,反复3-5次)。再于2-8℃,以1500×g离心10分钟,去除细胞碎片,收集上清液。超声过程中注意控制温度。... 产品常见问题 2023-11-21 ELISA研究
程浩 ELISA试验是否需要技术重复?阳性或阴性对照如何设置? 建议客户做技术重复,一方面确认操作手法,一方面验证和提高实验结果的准确性。 ELISA实验中的阳性对照可以认为就是标准品。阴性对照是与待捡物具有同源性和同质性的空白基质或者已知浓度很低的基质溶液,一般较难获取,如果有可以设置为阴性对照。常规是设定空白对照,即样本稀释液。... 产品常见问题 2023-11-21 ELISA研究
程浩 稀释方案 稀释100倍:一步稀释。取5μl样本到495μl标准品&样本稀释液内,做100倍稀释; 稀释1000倍:两步稀释。取5μl样本到95μl标准品&样本稀释液内,做20倍稀释,再取5μl 20倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释1000倍; 稀释100000倍:三步稀释。取5μl样本到195μl标准品&样本稀释液内,做40倍稀释,再取5μl 40倍稀释样本到245μl标准... 产品常见问题 2023-11-21 ELISA研究
程浩 试剂盒中铝箔袋、覆膜的用途是什么? 除了已真空封存酶标板的铝箔袋外,试剂盒内会附赠一个空的铝箔袋,客户可以将拆卸的酶标板条密封保存于新铝箔袋内并按照说明书要求存放组分。 覆膜是在孵育阶段用于密封板孔的粘性膜,能控制和减少孵育阶段水分的蒸发并更好地维持整板均匀受热,最大程度降低边缘效应对检测结果的影响。... 产品常见问题 2023-11-21 ELISA研究
程浩 一抗的使用浓度是多少? 我们的抗体是浓缩型的,抗体最终使用浓度除了跟抗体本身浓度有关,也跟样本中目的蛋白的丰度有关,所以我们说明书提供的抗体推荐稀释比是一个范围,最终稀释比例是需要您通过预实验确定的,当然您也可以咨询我们的技术团队给您推荐一个合适的稀释比来摸索实验条件。... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源
程浩 IHC在数据表上是什么意思?是冷冻切片吗?与IHC-F区别? IHC是免疫组化实验,使用的切片一般包含有IHC-P(石蜡切片)和IHC-F(冰冻切片)两种。... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源
程浩 有IHC实验应用性的抗体,20μl可以做几张片子? 首先客户需要根据抗体说明书&预实验结果来预估一下抗体的使用量,不同的样本,因抗原的表达量不同,抗体稀释比会有差异的。 例如:某个抗体的IHC实验,预实验确认按稀释比1:50计算,通常情况下,一张切片需要加入稀释后的抗体100μl,也就是一张切片需要2μl抗体,20μl大概可以做10张切片。... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源
程浩 如果抗体的Reactivity中没有包含我实验样本的物种,是否提供售后? 抗体说明书中提到的物种是确认可以做的,但不能保证抗体可用于未经验证的物种, 即使序列比对同源性高。抗体是否能识别其它物种样本内的蛋白涉及许多因素,我们无法做出预估。如果没有其它的选择,您必须考虑购买抗体用于未验证的物种,我们建议您将免疫原序列与您的目的蛋白序列进行比对,同源性高的话成功的可能性会比较大。如果您购买的抗体是用于未经验证的物种或者实验应用,一般无法提供产品的更换或者退款。... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源
程浩 抗体是否可以使用在说明书上没有反应性和应用上? 一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证适用于何种实验的类型(如: WB、IHC、IP、IF等), 如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,可能是我们这边没有做相应的验证,或者验证的样本效果不太好,一般如果没有的应用或者反应性不推荐客户使用,请尽量根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。 如果客户想尝试,可以提前咨询技术支持或者购买小规格进行相应实验尝试... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源
程浩 该如何选择二抗? 二抗根据一抗的来源和客户的实验需求来选择。 先看实验所用一抗的种属来源和亚型。根据一抗种属来源和亚型来决定二抗:如一抗是兔来源的IgG,那就选抗兔IgG的二抗,例如Goat Anti-Rabbit IgG;如一抗是小鼠来源的IgM,那就选抗小鼠IgM的二抗,例如Goat Anti-Mouse IgM。 标记物的选择。常见的标记物有有HRP、Biotin、荧光素等。 ELISA常用Biotin标记的... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源
程浩 抗体怎么选阳性对照? 阳性对照的使用是一个实验中确定抗体及检测系统是否正常工作的依据,也是确定待测标本中是否存在待测蛋白的一个依据!尤其是检测的标本不确定是否有待测蛋白表达时。因此当实验没有阳性结果出现时,最好选择实验合适的阳性对照,大部分说明书上都有推荐的阳性对照;或者根据说明书上的SwissProt 或 Omnigene 数据库查找,这些数据库经常会列出该蛋白在哪些组织里面高表达,这些样本可以作为合适的阳性对照。... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源
程浩 文献查的分子量与说明书上的有异议,同一指标为何有几种分子量? 因为同一蛋白在不同的种类的细胞中可能由于转录后有不同的剪切体、翻译后有不同的修饰方式,比如糖基化、泛素化等,分子量并不是唯一不变的,另外,蛋白官网Uniprot上可以查找到蛋白不同的亚型分子量大小是有差异的。所以文献上查到的分子量与说明书上抗体分子量有些会有一定的差异。(可以多查一些文献参考确认目的蛋白在目标样本中的分子量)。... 产品常见问题 2023-11-21 蛋白抗体资源